O DNA (ácido desoxirribonucleico) é um dos ácidos nucleicos que constituem o material genético da maioria dos seres vivos. O DNA é formado por nucleotídeos, e cada nucleotídeo é formado por uma molécula de desoxirribose, uma molécula de fosfato e uma base nitrogenada que pode ser púrica ou pirimídica. Show As bases púricas encontradas no DNA são adenina e guanina; e as bases pirimídicas são citosina e timina, sendo que a adenina liga-se à timina e a guanina liga-se à citosina através de pontes de hidrogênio. A partir da extração do DNA, será possível verificar o aspecto do DNA, observar que o DNA pode ser encontrado em diversos tipos de células e debater e aprofundar questões científicas relacionadas à genética. Em nossa atividade prática utilizaremos a cebola, pois ela possui pequenas quantidades de pectina (que podem ser facilmente confundidas com o DNA) e por apresentar células grandes que se rompem quando a cebola é picada. Para a nossa experiência serão necessários os seguintes materiais:
Fazendo a experiência
Se o professor dispuser de microscópio, todos poderão observar os filamentos de DNA na objetiva 40. Não pare agora... Tem mais depois da publicidade ;) O professor pode questionar os alunos sobre a função do sal de cozinha, do detergente e do álcool gelado utilizados na extração do DNA. Nesse caso, o detergente, por possuir um componente chamado de lauril sulfato de sódio, desnatura as membranas lipídicas e as proteínas, desintegrando os núcleos e os cromossomos das células da cebola, separando o DNA cromossômico. O sal misturado à água foi utilizado para neutralizar o DNA, que precipitará com o álcool gelado. O álcool gelado em solução salina proporciona uma solução heterogênea e faz com que as moléculas de DNA se aglutinem, formando a massa filamentosa e esbranquiçada. Quais são as quatro etapas principais da extração do DNA?Lise das membranas lipídicas; 2. Purificação do DNA; 3. Precipitação do DNA; 4. Reidratação do DNA.
Quais são as etapas para a extração do DNA passei direto?A primeira etapa é a extração propriamente dita e consiste no rompimento das membranas celulares (e consequente exteriorização do DNA). A segunda fase consiste na purificação do DNA em solução, ou seja, “retirada” dos outros componentes celulares da solução (restos de membrana, proteínas, RNA).
Como é feita a extração de RNA?Extração de RNA. 1 mL de TRIZOL para 5-10 milhões de células (pellet, in vitro...). ... . Incubar por 7 minutos.. Adicionar 200 uL de clorofórmio.. Agitar vigorosamente com a mão por 15 segundos.. Incubar de 2 a 3 minutos.. Centrifugar a 12.000 rpm por 15 minutos, 2-8ºC.. O que é a extração de DNA?A extração do DNA é o processo de isolamento do componente do material orgânico coletado, e ele pode ser realizado em diversos tipos de organismos e de diferentes formas.
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